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La Tecnica Usata Per Ottenere Gli OGM

Published on Nov 19, 2015

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PRESENTATION OUTLINE

1.

LA TECNICA PER OTTENER GLI OGM

4 SONO LE FASI PRINCIPALI
2.


L' ISOLAMENTO
Il gene si separa mediante un'enzima di restrizione .I tagli possono avvenire all'interno della catena per le endonucleasi ma Possono anche avvenire alle estremità per le esonucleasi.
Questi emzimi permettono di isolare singoli frammenti di DNA.
Ogni enzima taglia entrambi i filamenti della coppia elica .
I tagli sono spesso sfalsati e poichè vengono effettuati sempre in corrispondenza della stessa sequenza di basi tutti i frammenti hanno estremità coesive complementari

Gli enzimi di restrizione sono complessi proteici capaci di tagliare il DNA in corrispondenza di specifiche sequenze di basi, diverse per ciascun enzima , permettendo così di frammentare il genoma in maniera precisa e riproducibile.
3.

L'INSERIMENTO
Il gene isolato viene inserito in un vettore molecolare o direttamente nelle cellule vegetali, batteriche o animali.
Esistono diverse tecniche di inserimento :
-elettroporazione
-metodo biolistico
-PEG
-utilizzo di agrobacterium
-utilizzo di sali
-coniugazione
-micro iniezione
-fusione di protoplasti

4.

LA REPLICAZIONE
Si replica il batterio in modo da ottenere l'amplificazione del gene da trasferire .

5.

IL TRASFERIMENTO
Il trasferimento del plasmide , che veicola il gene nella cellula germinale di un'altra specie , ottenendo così un nuovo individuo con le capacità desiderate .

Alessandra Vicini